GDSBio NGS مكتبة بناء سريع dna مكتبة و prep عدة ل MGI

GDSBio NGS مكتبة بناء سريع dna مكتبة و prep عدة ل MGI

تفاصيل المنتج:

مكان المنشأ: الصين
اسم العلامة التجارية: GDSBio
إصدار الشهادات: ISO9001, ISO13485
رقم الموديل: KM004-A، KM004-B

شروط الدفع والشحن:

الحد الأدنى لكمية: 1 صندوق
تفاصيل التغليف: صغير يوزّع مجموعة أو شحن أو oem
وقت التسليم: 8 عمل يوم
شروط الدفع: L/C، D/A، D/P، T/T، ويسترن يونيون، MoneyGram
القدرة على العرض: 10000 صندوق/صندوق لكلّ يوم
افضل سعر اتصل

معلومات تفصيلية

قط. ما من.: KM004-A، KM004-B مواصفة: KM004-A/24 rxns; KM004-B/96 rxns
مظهر: سائل واضح مخزون: نعم
علامة تجاريّة يطبع: مع علامة تجاريّة يطبع نقل مجموعة: يحزم
رصيف صخري حياة: 12 شهر تخزين شرط: مخزن في درجة حرارة room (15-25°C) ونقل في درجة حرارة room.
تسليط الضوء:

rna فيروسيّ محمّض نوويّ حامض إستخراج عدة,dna فيروسيّ محمّض نوويّ حامض إستخراج عدة,ممسحة rna إستخراج عدة

,

DNA Viral Nucleic Acid Extraction Kit

,

Swab rna extraction kit

منتوج وصف

سريع dna مكتبة و prep عدة ل MGI

[منتوج إسم]

سريع dna مكتبة و prep عدة ل MGI

[قط. ما من. /Spec.]

KM004-A/24 rxns; KM004-B/96 rxns; عينة sack/6 rxns

[منتوج وصف]

يتّجه MGI يزوّد طلعة جوّيّة يسلسل منصة، هذا عدة ملائم وعالميّ dna مكتبة بناء خطة في واحد أنبوب. هو يضمّ تشظية، نهاية إصلاح و équeutage داخل واحد خطوة، للغاية يوجز الوقت من مكتبة بناء ويقلّل الخطأ يسبّب ب steps مضجر. بعد تشظية ونهاية تحضير، المنتوج يستطيع كنت مباشرة ربطت مع مهايئة دون تطهير إضافيّ، والإجراء لاحق ال نفس بما أنّ أنّ من #KM001 سريعا dna مكتبة prep عدة ل MGI. كامل مكتبة تكمية يستطيع كنت أنجزت ب dsDNA لاصف صبغ طريقة (e.g.، thermo Qubit سلك معزول مقياس فلوريّة) أو تكمية مطلق PCR بعد يخفّف المكتبة إلى تركيز مناسب.

[عينة نوع]

طاولة 1 يوصي مدخل ل dna عاديّ

تطبيق عينة نوع مبلغ الموصى به
كامل جينات يسلسل جينات عالي الجودة معقّد 50ng-1μg
هدف إعتقال يسلسل من exome كامل جينات عالي الجودة معقّد 10ng-1μg
هدف إعتقال يسلسل من جينات كامل FFPE dna ≥50ng
كامل جينات يسلسل جينات microbial 1ng-1μg

[تخزين شرط & رصيف صخري حياة]

كلّ كاشف سوفت كنت خزّنت في -20°C. عمليّة ربط مصد عاديّ لبلور أن يعجّل في درجة حرارة منخفض، هو سوفت كنت وازنت إلى درجة حرارة room قبل إستعمال. المنتوج شرعيّ ل 12 شهر.

[عنصر]

عنصر 24 rxns 96 rxns
FEP مصد 120 μl 480 μl
FEP أنزيم مزيج 240 μl 2×480 μl
سريع dna أنزيم رابط 120 μl 2×240 μl
سريع عمليّة ربط مصد 600 μl 4×600 μl
2× hifi مكتبة PCR سيد مزيج 600 μl 4×600 μl
مزيج مبتدأ ل MGI * 120 μl 480 μl
إبطال فعّاليّة مصد 120 μl 480 μl

*FEP مصد التشظية ونهاية تحضير ردّ فعل مصد. FEP أنزيم مزيج خليط الأنزيم يرتبط إلى تشظية ونهاية تحضير.

* إن يكون هناك أكثر من واحد عينة، #KM002 و #KM003 مهايئة كبسولة تفجير مزيج أوصيت. يزوّد هذا عدة مجموعة الكبسولة تفجير، التسلسل مبتدأ كما يلي:

5'- tgtgagccaaggagttg-3'

5'- gaacgacatggctacga-3'

بطاقة: يوصي إنتقاء خرزة: #NC1011 GDSPure dna إنتقاء Magbeads أو AMPure XP خرزة.

[بطاقة]

1. نحن نقدّم إثنان نوع من عالميّ مهايئة كبسولة تفجير يثبت (GDS مهايئة، #KM002 و #KM003، يشتري على حدة)، غير أنّ زبون يستطيع أيضا اخترت من آخر صاحب مصنع أو يصطنع هم خاصّة مهايئة ل ال MGI يسلسل منصة. سيقود كثيرا جدا مهايئة إلى التشكيل من مهايئة مبلمر ثنائيّ جزيء، ومهايئة غير كاف سيقود إلى منخفض مكتبة إنتاج. لذلك، مناسب مهايئة يحدّد تركيز التركيز ونوعية المكتبة. ال يوصي مهايئة أبديت تركيز لمبلغ مختلف من dna مدخل في الطاولة تالي:

طاولة 2 يوصي إستعمال تركيز المهايئة

dna مدخل يوصي conc. لمهايئة مهايئة: أدخلت عميل نسبة GDS مهايئة تخفيف Degrees*
1μg 10μM 10:1 ما من تخفيف
500ng 10μM 20:1 ما من تخفيف
250ng 10μM 40:1 ما من تخفيف
100ng 7.5μM 100:1 3:4
50ng 5μM 200:1 1:2
25ng 2.5μM 200:1 1:4
1ng 1μM 200:1 1:10

* عبّر عن كالحجم نسبة المهايئة إلى مخفف

2. الأنزيم يستعمل في 2× hifi مكتبة PCR سيد مزيج b أسرة dna polymerase، أيّ يتلقّى 5“- 3”polymerase و3“- 5”exonuclease نشاط، غير أنّ يفتقر 5“- 3”exonuclease نشاط. هو يتلقّى عال حالة إخلاص وتجانسية، وقوّيّ قابل للمحافظة تأليف قدرة. رقابة صارمة من الرقم من تضخيم دورة بشكل خاصّ مهمّ لمكتبة إنتاج. يبدي الطاولة تالي ال يوصي رقم من تضخيم دورة يماثل إلى مبلغ مختلف dna يدخل:

طاولة 3 يوصي رقم من تضخيم دورة يماثل إلى مختلف عينة مدخل

مدخل dna يوصي رقم من تضخيم دورة
100ng مكتبة 1μg مكتبة
1μg 0 2-5
500ng 0 2-5
250ng 1-3 5-7
100ng 2-4 6-8
50ng 4-6 8-10
25ng 5-7 9-12
10ng 7-9 11-13
5ng 9-11 13-14
2.5ng 10-12 14-16
1ng 11-13 15-17

بطاقة: 1. يبدي الطاولة آنف النتائج الاختبار يستعمل 150bp dna معياريّ، أيّ يكون لمرجع فقط.

2. إن استعملت وصلة ناقص يكون، عدد الأدنى الدورة (1-3) سوفت كنت ضخّمت أن ينال مكتبة كامل.

3. إن يكون النوعية من المدخل dna فقير، أو الحجم إنتقاء يكون وفيت أثناء المكتبة بناء، الرقم من تضخيم دورة سوفت كنت بشكل مناسب زدت.

[معياريّ مكتبة بناء عملية]

تشظية ونهاية إصلاح

1. حدّدت التركيب solvent من طبعة dna، إن ما من edta، باشرت مباشرة إلى خطوة 2؛ إن احتويت edta يكون، 2.2× خرزة مغنطيسيّ سوفت كنت استعملت لتطهير، أو يماثل حجم من إبطال فعّاليّة مصد سوفت كنت أضفت وفقا ل المحتوى الedta في الطاولة تالي لإبطال فعّاليّة:

edta conc. حجم من إبطال فعّاليّة مصد
1mM 5 μl
0.8mM 4 μl
0.6mM 3 μl
0.5mM 2.5 μl
0.4mM 2 μl
0.2mM 1 μl
0.1mM 0.5 μl
<0> 0 μl

2. أعدّت الردّ فعل تالي في 200 μl PCR أنبوب:

كاشف حجم
مدخل dna X μl
FEP مصد 5 μl
إبطال فعّاليّة مصد Y μl
ddH2 o To 65 μl

3. أضفت 10 μl FEP أنزيم مزيج إلى النظام آنف، ضرب بالتّساوي، طردت بإيجاز، وفورا وضعت داخل PCR جهاز للردّ فعل تالي:

درجة حرارة وقت
20°C 15min
37°C أحلت طاولة 4
65°C 15min
4°C

طاولة 4 يمسك وقت المطلوب أن ينال مكتبة البأحجام مختلفة

جزء حجم وقت
150bp 20-30min
250bp 15-20min
350bp 10-15min
550bp 6-10min

مهايئة عمليّة ربط

1. باشرت مع العمليّة ربط ردّ فعل في أسرع وقت ممكن بعد تشظية ونهاية تحضير.

2. خفّفت المهايئة وفقا ل طاولة 2.

3. أعدّت التالي ردّ فعل نظام:

كاشف حجم
فوق منتوج 50 μl
سريع عمليّة ربط مصد 25 μl
سريع dna أنزيم رابط 5 μl
مهايئة x ل MGI 5 μl
ddH2 o 15 μl
مجموع 100 μl

4. يطرد دوامة بلطف وتدويم إلى أسفل بإيجاز أن يمزج جيّدا، بإيجاز ويجمع all the سائل إلى القعر من الأنبوب.

5. أنجزت الردّ فعل تالي في cycler حراريّ:

درجة حرارة وقت
20°C 15min
4°C

يوصي حل ل PCR تنظيف/حجم إنتقاء (الخاصّ مغنطيسيّ خرزة حجم سوفت كنت كيّفت وفقا ل الحقيقيّ عينة حجم)

1. أعدّت 100 μl عمليّة ربط منتوج داخل مناسب نابذة أنبوب.

2. أضفت 100 μl من يعلق dna إنتقاء خرزة مغنطيسيّ إلى العينة. بلطف فجّرت مع ماصّة ل 10 وقت (أو دوامة ل 30 s). حضنت عينة ل 5 min في درجة حرارة room.

3. وضعت الأنبوب على منصب جريدة مسنّنة مناسب مغنطيسيّ أن يفصل الخرزة من المادّة طافية. أزلت عندما الحل واضح، بعناية ونبذت المادّة طافية مع ماصّة (لا ينبذ خرزة).

4. أضفت 200 μl من 80% إيثانول freshly prepared إلى الأنبوب بينما في المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. لا يزعج حضنت في درجة حرارة room ل 30 s، وبعد ذلك بعناية أزلت ونبذت المادّة طافية (خرزة).

5. كرّرت خطوة 4 مرّة لمجموع من إثنان غسل.

بطاقة: يوقن أن يزيل كلّ سائل مرئيّ بعد الثاني wash.

6. air dry الخرزة إلى أن يتلقّى السطح من الخرزة مغنطيسيّ ما من لمعان واضح بينما الأنبوب يكون على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ مع الغطاء مفتوح.

بطاقة: يتمّون لا overdry الخرزة، هذا يمكن نتجت في إستعادة lower dna. عندما يبدأ الخرزة أن ينصدع، هم أيضا جافّ.

7. أزلت الأنبوب من المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. أضفت 22 μl تصفية تتابعيّة مصد (10mM Tris-HCl، pH8.0-8.5) إلى الأنبوب. مزجت جيّدا ب pipette عبر على الأقل 10 وقت أو على دوامة خلاط ل 30 يحضن s. ل 3-5 min في درجة حرارة room.

8. وضعت الأنبوب على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. نقلت بعد 5 min (أو عندما الحل واضح)، 20 μl مادّة طافية إلى أنبوب جديد. أتمّت الإنتقاء، وال ينتقي dna يستطيع كنت استعملت لتجربة لاحق أو خزّنت في -20°C لفترة طويلة.

مكتبة تضخيم

1. أعدّت الردّ فعل تالي في PCR أنبوب:

كاشف حجم
عمليّة ربط منتوج بعد تنظيف أو حجم إنتقاء 20 μl
2× hifi مكتبة PCR سيد مزيج 25 μl
مزيج مبتدأ ل MGI 5 μl
مجموع 50 μl

2. يطرد دوامة بلطف وتدويم إلى أسفل بإيجاز أن يمزج جيّدا، بإيجاز ويجمع all the سائل إلى القعر من الأنبوب.

3. أنجزت الردّ فعل تالي في cycler حراريّ:

درجة حرارة وقت دورة رقم
95°C 3min 1
98°C 20sec

 

انتقيت عدد المناسب الدورة وفقا ل طاولة 3

60°C 15sec
72°C 30sec
72°C 5min 1
4°C -

يوصي حل ل PCR تنظيف/حجم إنتقاء (الخاصّ مغنطيسيّ خرزة حجم سوفت كنت كيّفت وفقا ل الحقيقيّ عينة حجم)

1. أعدّت 50 μl عمليّة ربط منتوج داخل مناسب نابذة أنبوب.

2. أضفت 45 μl من يعلق dna إنتقاء خرزة مغنطيسيّ إلى العينة. بلطف فجّرت مع ماصّة ل 10 وقت (أو دوامة ل 30 s). حضنت عينة ل 5 min في درجة حرارة room.

3. وضعت الأنبوب على منصب جريدة مسنّنة مناسب مغنطيسيّ أن يفصل الخرزة من المادّة طافية. أزلت عندما الحل واضح، بعناية ونبذت المادّة طافية مع ماصّة (لا ينبذ خرزة).

4. أضفت 200 μl من 80% إيثانول freshly prepared إلى الأنبوب بينما في المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. لا يزعج حضنت في درجة حرارة room ل 30 s، وبعد ذلك بعناية أزلت ونبذت المادّة طافية (خرزة).

5. كرّرت خطوة 4 مرّة لمجموع من إثنان غسل.

بطاقة: يوقن أن يزيل كلّ سائل مرئيّ بعد الثاني wash.

6. air dry الخرزة إلى أن يتلقّى السطح من الخرزة مغنطيسيّ ما من لمعان واضح بينما الأنبوب يكون على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ مع الغطاء مفتوح.

بطاقة: يتمّون لا overdry الخرزة، هذا يمكن نتجت في إستعادة lower dna. عندما يبدأ الخرزة أن ينصدع، هم أيضا جافّ.

7. أزلت الأنبوب من المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. أضفت 22 μl تصفية تتابعيّة مصد (10mM Tris-HCl، pH8.0-8.5) إلى الأنبوب. مزجت جيّدا ب pipette عبر على الأقل 10 وقت أو على دوامة خلاط ل 30 يحضن s. ل 3-5 min في درجة حرارة room.

8. وضعت الأنبوب على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. نقلت بعد 5 min (أو عندما الحل واضح)، 20 μl مادّة طافية إلى أنبوب جديد. أتمّت الإنتقاء، وال ينتقي dna يستطيع كنت خزّنت في 2-8°C ل 1-2 أسبوع أو خزّنت في -20°C لفترة طويلة.

[ملحق] يوصي خطة لإنتقاء double-Sided

إن تطلّبت إنتقاء rond يكون، نحن نزوّد الخطة تالي أن ينتقي المناسب مغنطيسيّ خرزة حجم وفقا ل ال يتوقّع مكتبة حجم. الحجم إنتقاء يستطيع كنت أنجزت قبل نهاية إصلاح أو بعد تضخيم. سيقلّل إثنان أو أكثر إنتقاء rond للغاية المكتبة عائد ماليّ.

ملأت المكتبة حجم في الطاولة أدناه إلى 100 μl. انتقيت الحجم من خرزة مغنطيسيّ في إثنان دورة وفقا ل ال يتوقّع مكتبة حجم. ووفيت الإنتقاء عملية وفقا ل التعليم تالي.

طاولة 5 مبلغ الموصى به من خرزة مغنطيسيّ لإنتقاء rond

يتوقّع مكتبة حجم 150bp 200bp 250bp 300bp 400bp 500bp 600bp 700bp
حجم الخرزة (μl) حول 1 100 90 80 70 60 55 50 45
حول 2 30 20 20 20 20 15 15 15

1. ملأت المكتبة حجم إلى 100 μl في 200μl PCR أنبوب ويعلم ك A. إضافة يحضن حجم مؤكّد من خرزة مغنطيسيّ وفقا ل الطاولة 5 (حول 1) إلى الأنبوب A. Gently ضرب مع ماصّة ل 30 s. عينة ل 5 min في درجة حرارة room.

2. وضعت الأنبوب a على منصب جريدة مسنّنة مناسب مغنطيسيّ أن يفصل الخرزة من المادّة طافية. أزلت عندما الحل واضح، بعناية المادّة طافية إلى أنبوب جديد وعلمت هو ك B. منبوذ خرزة.

3. أضفت حجم مؤكّد من خرزة مغنطيسيّ وفقا ل الطاولة 5 (حول 2) إلى الأنبوب B. Gently ضرب مع ماصّة ل 30 s. يحضن عينة ل 5 min في درجة حرارة room. وضعت الأنبوب b على منصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. أزلت عندما الحل واضح، بعناية ونبذت المادّة طافية.

4. أضفت 200 μl من 80% إيثانول freshly prepared إلى الأنبوب b بينما في المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. لا يزعج حضنت في درجة حرارة room ل 30 s، وبعد ذلك بعناية أزلت ونبذت المادّة طافية (خرزة).

5. كرّرت خطوة 6 مرّة لمجموع من إثنان غسل.

بطاقة: يوقن أن يزيل كلّ سائل مرئيّ بعد الثاني wash.

6. air dry الخرزة إلى أن يتلقّى السطح من الخرزة مغنطيسيّ ما من لمعان واضح بينما الأنبوب b يكون على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ مع الغطاء مفتوح.

بطاقة: يتمّون لا overdry الخرزة، هذا يمكن نتجت في إستعادة lower dna. عندما يبدأ الخرزة أن ينصدع، هم أيضا جافّ.

7. أزلت الأنبوب b من المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. أضفت 22 μl تصفية تتابعيّة مصد إلى الأنبوب. مزجت جيّدا ب pipette عبر على الأقل 10 وقت أو على دوامة خلاط ل 30 يحضن s. ل 3-5 min في درجة حرارة room.

بطاقة: إن سينجز يستهدف إعتقال لن يكون، أضفت تصفية تتابعيّة مصد (10mM Tris-HCl، ph 8.0-8.5) لتصفية تتابعيّة. خلاف ذلك، يطهّر ultrapure ماء سوفت كنت استعملت لتصفية تتابعيّة.

  • وضعت أنبوب b على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. إنتقال 20 μl مادّة طافية إلى أنبوب جديد.

 

لبحث إستعمال فقط

GDSBio NGS مكتبة بناء سريع dna مكتبة و prep عدة ل MGI 0

GDSBio مشروع ذو تكنولوجيا عالية focusing على بحث، إنتاج وعمليّة بيع من عالي الجودة علم منتوج. يتلقّى الشركة كامل منتوج خطّ، مع PCR تكنولوجيا كاللب، focusing على PCR عامّ، لصف كمّيّ PCR، NGS تخزين، حامض محمّض نوويّ إستشراد وآخر جزيئيّ علم الأحياء تكنولوجيا، ويطوّر جزيئيّ بحث كاشف، مواد الخام جزيئيّ in vitro تشخيصيّ، حامض محمّض نوويّ إستخراج وكشف كاشف وآخر منتوج.

GDSBio NGS مكتبة بناء سريع dna مكتبة و prep عدة ل MGI 1GDSBio NGS مكتبة بناء سريع dna مكتبة و prep عدة ل MGI 2

 

تريد أن تعرف المزيد من التفاصيل حول هذا المنتج
أنا مهتم بذلك GDSBio NGS مكتبة بناء سريع dna مكتبة و prep عدة ل MGI هل يمكن أن ترسل لي مزيدًا من التفاصيل مثل النوع والحجم والكمية والمواد وما إلى ذلك.
شكر!